【口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗（主要成分：该病毒的一种结构蛋白VP1），过程如图所示．请据图回答下列问题：（1）在上述实】
更新时间：2024-04-25 17:58:10
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问题描述：
口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗（主要成分：该病毒的一种结构蛋白VP1），过程如图所示．请据图回答下列问题：
（1）在上述实验过程中所涉及的生物技术工程有____、___，如图所示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具酶有___ 和___．
（2）⑤过程代表的是___，经过该过程形成的细胞具有分裂能力强，分化程度低等特点．
（3）⑥培养基中添加___可筛选能表达疫苗的细胞；检测转化成功的蕃茄植株，除检测标记基因产物外，还可采用___技术检测目的基因在蕃茄体内是否转录．
（4）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用___技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是___、酶、dNTP、模板；然后构建基因表达载体．基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有___．
顾启泰回答：
（1）由以上分析可知，上述实验过程涉及的生物技术工程有基因工程、植物细胞工程；基因表达载体的构建过程中，需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．
（2）⑤表示脱分化过程，该过程形成的产物是愈伤组织，具有分裂能力强，分化程度低的特点．
（3）由图可知，运载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此在⑥培养基中添加卡那霉素可筛选能表达疫苗的细胞；检测目的基因是否转录形成mRNA可采用分子杂交技术，即用DNA分子探针和受体细胞中的mRNA分子进行杂交，观察是否形成杂交带．
（4）PCR技术可在体外快速扩增目的基因，PCR的条件：模板（目的基因）、原料（四种脱氧核苷酸）、引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有标记基因．
故答案为：
（1）基因工程 植物细胞工程（或植物组织培养） 限制酶和DNA连接酶
（2）脱分化
（3）卡那霉素 分子杂交
（4）PCR（聚合酶链式反应） 引物 标记基因
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