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(2008•江苏)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力.以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表.请根据以上图表回答下列问题.(1)
更新时间:2024-04-19 13:23:37
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问题描述:

(2008•江苏)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力.以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表.

请根据以上图表回答下列问题.

(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是______.

(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定.表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图.请判断哪一对引物可采用较高的退火温度?______.

(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?______.

(4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为______.

(5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切,.假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断.

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到______种DNA片断.

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到______种DNA片断.

李从新回答:
  (1)PCR方法扩增目的基因的过程中,需要进行高温解链过程,因此使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性.   (2)耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大,因为它们之间形成三个氢键,因此稳定性强.引物B中含C与G的碱基对较多,可采用较高的退火温度.   (3)多种限制酶切割,形成不同的切割位点,所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求.   (4)植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞.   (5)据图分析,用到了EcoRI酶和AluI酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段,而用EcoRI酶和SmaI酶切割质粒产生了M、N两个片段,且M、N片段间存在PstI酶切点.因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒,由于保留了Pstl的切割位点,所以可以得到两种DNA分子.而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中,如图I-②过程只能产生一种DNA片断.   故答案为:   (1)耐高温   (2)引物对B   (3)否   (4)农杆菌   (5)①2 ②1
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