【肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图】-我查吗问答

【肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图】

更新时间：2024-04-27 07:51:02

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问题描述：

肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．

请回答：

（1）进行过程①时，需用___酶切开载体以插入let-7基因．进行过程②时，需用___酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．

（2 ）研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2．据图分析，可从细胞提取___进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中___（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的．

（3）现有一长度为为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子形态为___．

（4）某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理，然后用这两种酶同时处理，得到如下片段（kb为千个碱基对）：

片段及长度

限制酶
HindⅢ	2.5kb，5.0kb
Sma I	2.0kb，5.5kb
HindⅢ和Sma I	2.5kb，3.0kb，2.0kb

可以推知限制酶HindⅢ和Sma I在此DNA分子中分别有___个识别序列．两酶同时处理后得到的片段，再用限制酶EcoR I处理，结果导致凝胶上3.0kb的片段消失，产生一种1.5kb的新片段；那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割，则可得到长度分别为___的片段．

贺茂坤回答：

网友采纳

　　（1）基因工程中用到的基因剪刀是限制性核酸内切酶．要将组织细胞分散开需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理．　　（2）由图2可以看出let一7基因是通过影响转录来影响癌基因RAS表达的，因此从细胞中提取RNA进行分子杂交，以直接检测1et一7基因是否转录．影响转录后RAS蛋白质不能合成，含量会减少．　　（3）一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的一个DNA分子，说明该DNA分子是环状的．　　（4）由表格信息可知分别用限制酶HindⅢ和SmaI处理后得到的都只有2个片段，说明这个DNA分子中都只有1个它们的酶切位点．限制酶EcoRI处理，凝胶上3.0kb的片段消失，产生一种1.5kb的新片段，说明在这段DNA正中间含有一个EcoRI酶酶切位点，综合表格信息可知该DNA片段共有7.7kb，在2.5kb处有HindⅢ酶切位点，在5.5kb处有SmaI酶切位点，在4.0kb处有EcoRI酶切位点，因此用限制酶HindⅢ和EcoRI将该线性DNA分子进行切割，可得到2.5kb、1.5kb、3.5kb的片段．　　故答案：　　（1）限制性核酸内切酶（或限制）胰蛋白　　（2）RNA RAS蛋白　　（3）环状　　（4）1、1 1.5、2.5、3.5